构建病毒载体克隆
载体中心可根据北京脑中心科研人员的实验需求构建所需的pAAV、Lentivirus或Retrovirus病毒载体质粒;为鼓励共享,将对同意共享的病毒载体质粒构建服务提供额外优惠。如果申请者同意共享,载体中心将会把所构建的病毒载体质粒纳入共享库;如果申请者不同意共享,载体中心将不会保留任何质粒、菌液备份。注意,只有当申请人所提供的模板(基因或元件)未被包含在现有共享质粒库中时,才可选择不共享。
病毒载体克隆构建服务申请流程
a) 申请者根据自己实验所需选择构建病毒载体骨架、克隆表达框的启动子、目的基因、荧光标记、调控元件等具体细节。载体中心的共享质粒库中保存有多种不同用途的载体骨架和元件可供选择,请自行前往在线服务系统查阅。如有任何问题,欢迎随时联系咨询。
b) 如需要克隆不包含在共享质粒库中的基因或元件,申请人需提供克隆模板质粒、质粒图谱、目的基因或元件序列等必要信息。如需合成该基因或元件,请申请实验室自行向公司提交合成申请并支付合成费用,或由载体中心合成并收取相应费用。
c) 请提前联系载体中心(vectorcore@cibr.ac.cn)提出克隆要求,载体中心将基于需求设计克隆方案,克隆服务申请者在确认克隆方案后,请在“载体中心在线服务”的“克隆服务”下提交克隆申请,以及设计方案和图谱。
d) 克隆服务以一个一步法克隆为单位,复杂克隆将按照一步法克隆操作数量相应增加服务费;如在克隆过程中遇到任何问题,载体中心将及时与服务申请人联系沟通,并讨论可能的问题原因和解决方案。
e) 待克隆完成后,载体中心将会以邮件形式通知申请人,并同时开始病毒载体包装工作。
注:一般情况下,病毒载体质粒构建耗时约1-2周,但具体时间视构建难易程度而定。
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