购买质粒和细胞系
为方便北京脑中心各实验室开展研究工作,载体中心将收集各实验室的质粒和细胞系购买需求,在每月第一周(如遇法定假日则提前)联系Addgene中国代理(北京中原公司)和北京协和细胞资源中心,协助大家购买所需的质粒和细胞系。
凡经由载体中心协助购买的质粒和细胞系,均将对北京脑中心各实验室研究人员开放共享;为鼓励实验材料共享,载体中心将对协助购买的质粒(仅限质粒,不包含文库)与细胞系提供实际购买价格20%的额外补贴。
质粒和细胞购买服务申请流程
a) 请需要订购质粒者自行在Addgene官网(http://www.addgene.org)查询所需质粒。
b) 请需要订购细胞者自行在国家实验细胞资源共享平台(http://www.cellresource.cn)查询所需细胞,并确认“中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心”(即北京协和医院细胞库)保藏有该细胞系。
c) 请各实验室管理员汇总统计本实验室质粒和细胞系购买信息,以实验室为单位填写“质粒购买或领用申请表” (Form VC213)或“细胞系购买或领用申请表” (Form VC223),在每月25日以前以邮件方式发送给载体中心(VectorCore@cibr.ac.cn),并抄送给所在实验室负责人(PI或技术中心主任)和载体中心主任 (赵非,zhaofei@cibr.ac.cn)。
d) 载体中心会在第一时间回复邮件以确认质粒和细胞系购买申请,并以申请表为依据,按照邮件接收顺序尽快安排购买。如需更改或取消购买申请,请及时以邮件方式告知;若已经开始购买流程,则无法更改或取消该服务,载体中心会以邮件形式反馈。
e) 所有经载体中心协助购买的质粒和细胞系默认为北京脑中心全体实验室共享,由载体中心代为保存。
注:因为Addgene质粒到货周期较长、细胞库复苏细胞时间不定等多方原因,载体中心无法保证质粒和细胞系的具体到货时间。根据经验,Addgene质粒到货时间为付款并签订MTA后6-8周,北京协和医院细胞库细胞系到货时间为付款后4-6周。
f) Addgene质粒多以细菌穿刺管形式运送;到货后,载体中心将会进行甘油管保种,并提取质粒保存,经酶切或测序鉴定无误后,将穿刺管及一份经鉴定的甘油管和质粒交给购买申请人。
g) 从Addgene购买的文库多以混合质粒形式运输,为保障使用者在使用该文库时拥有最佳库容,载体中心会在收到文库后直接转交购买申请者,由申请人对该文库按照文库提交者(depositor)简易的方法进行扩增和保存。请务必提交一份文库备份(混合菌甘油管和/或混合质粒)交给载体中心保存,同时面向北京脑中心开放供共享。因文库价格较高,载体中心不再对文库购买进行补贴,望理解。
h) 收到细胞系取货通知后,载体中心将在第一时间赴北京协和医院细胞库取得所购买细胞系,并按所提供的信息进行扩增、冻存一批细胞,并进行支原体检测。
i) 如因工作安排原因实在无法由载体中心进行细胞系扩增,根据实际情况可能需要请细胞申请者代为进行扩增冻存工作,并将冻存的细胞(5支 × 2 × 106细胞/支)转交载体中心保藏与中心共享细胞库中,望理解。
j) 载体中心将在进行质粒和细胞系的扩增保种工作同时,以邮件形式通知购买这所在实验室,请购买者准时领取并进行交付登记。
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